CCS C 50
北京预防医学会团体标准
T/BPMA 31—2024
母乳、血液和尿液中 氯酸盐和高氯酸盐的测定
Determination of chlorate and perchlorate in breast milk, plasma and urine
2024 - 07 - 30 发布 2024 - 07 - 30 实施
北京预防医学会 发布
前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由北京市疾病预防控制中心提出。
本文件由北京预防医学会归口。
本文件起草单位：北京市疾病预防控制中心、北京市延庆区疾病预防控制中心、北京市大兴区疾病
预防控制中心。
本文件主要起草人：张晶、尹杰、姚凯、郭巧珍、孟娟、林强、李倩、巩俐彤、王泽林。
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母乳、血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的测定
1 范围
本文件规定了母乳、血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的液相色谱-质谱/质谱测定方法以及离子色
谱-质谱/质谱测定方法。
本文件适用于母乳、血液和尿液中氯酸盐和高氯酸盐的测定。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过本文的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
方法一 液相色谱-质谱/质谱法
4 原理
母乳、血液和尿液中的氯酸盐和高氯酸盐用乙腈-甲酸水溶液提取，复合固相萃取小柱净化，采用液
相色谱串联质谱检测，同位素内标法定量。
5 试剂和材料
除非另有说明，本方法所有试剂均为色谱级，水为GB/T 6682规定的一级水。
5.1 试剂
5.1.1 乙腈（CH3CN）。
5.1.2 甲酸（HCOOH）。
5.2 试剂配制
5.2.1 0.1 %甲酸水溶液：取1 mL 甲酸，用水稀释定容至1 000 mL，混匀。
5.2.2 乙腈-甲酸水溶液：取60 mL乙腈，用0.1 %甲酸水溶液定容至100 mL，混匀。
5.3 标准品
5.3.1 氯酸钠（NaClO3，CAS 号：7775-09-9）：纯度＞99 %，或经国家认证并授予标准物质证书的
标准品。
5.3.2 高氯酸钠（NaClO4，CAS 号：7601-89-0）：纯度＞99 %，或经国家认证并授予标准物质证书
的标准品。
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5.3.3 18O3-氯酸盐（氯酸盐同位素内标）：100 μg/mL（以18O3-氯酸根计）。
5.3.4 18O4-高氯酸盐（高氯酸盐同位素内标）：100 μg/mL（以18O4-高氯酸根计）。
5.4 标准溶液配制
5.4.1 氯酸盐标准储备液（1.0 mg/mL，以氯酸根计）：准确称取氯酸钠1.280 1 g，用水溶解并定容至
1 000 mL，混匀。2~8 ℃保存，有效期为1 年。
5.4.2 高氯酸盐标准储备液（1.0 mg/mL，以高氯酸根计）：准确称取高氯酸钠1.230 0 g，用水溶解并定
容至1 000 mL，混匀。2~8 ℃保存，有效期为1 年。氯酸盐和高氯酸盐标准储备液可采用经国家认证并
授予标准物质证书的标准品。
5.4.3 高氯酸盐标准储备中间液（100 μg/mL）：准确吸取10.0 mL高氯酸盐标准储备液（5.4.2），置于100
mL容量瓶中，用水稀释定容至刻度，混匀，将溶液转移至试剂瓶中。2~8 ℃保存，有效期为1年。
5.4.4 氯酸盐和高氯酸盐混合标准中间液：分别准确吸取1.00 mL 氯酸盐标准储备液（5.4.1）和1.00
mL 高氯酸盐标准储备中间液（5.4.3），置于同一100 mL 容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，摇匀，制
成氯酸盐、高氯酸盐浓度分别为10 μg/mL 和1.0 μg/mL 的混合标准中间液，将溶液转移至试剂瓶中。
2~8 ℃保存，有效期为3 个月。
5.4.5 氯酸盐和高氯酸盐混合标准使用液I：准确吸取1.00 mL氯酸盐和高氯酸盐混合标准中间液（5.4.4），
置于10 mL 容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，摇匀，制成氯酸盐、高氯酸盐浓度分别为1 000 g/L 和
100 g/L 的混合标准使用液，将溶液转移至试剂瓶中。2~8 ℃保存，有效期为1 个月。
5.4.6 氯酸盐和高氯酸盐混合标准使用液II：准确吸取1.00 mL 氯酸盐和高氯酸盐混合标准使用液I
（5.4.5），置于10 mL 容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，摇匀，制成氯酸盐、高氯酸盐浓度分别为100
g/L 和10 g/L 的混合标准使用液，将溶液转移至试剂瓶中。2~8 ℃保存，有效期为1 个月。
5.4.7 氯酸盐和高氯酸盐同位素内标混合标准中间液：准确吸取0.50 mL 氯酸盐同位素内标（5.3.3）和
50 μL 高氯酸盐同位素内标（5.3.4），置于同一10 mL 容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，摇匀，制成
氯酸盐内标、高氯酸盐内标浓度分别为5.0 μg/mL 和0.50 μg/mL 的混合标准中间液。2~8 ℃保存，有效
期为3 个月。
5.4.8 氯酸盐和高氯酸盐同位素内标混合标准使用液：准确吸取2.00 mL 氯酸盐和高氯酸盐同位素内标
混合标准中间液（5.4.7），置于10 mL 容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，摇匀，制成氯酸盐内标和高
氯酸盐内标浓度分别为1.0 μg/mL 和0.10 μg/mL 的混合标准使用液。2~8 ℃保存，有效期为3 个月。
5.4.9 氯酸盐和高氯酸盐标准系列工作液：分别准确吸取0 L、250 L、500 L 氯酸盐和高氯酸盐混
合标准使用液II（5.4.6），100 L、500 L、1 000 L、5 000 L 氯酸盐和高氯酸盐混合标准使用液I
（5.4.5）及200 L 同位素内标混合标准使用液（5.4.8），用水稀释并定容至10 mL。氯酸盐浓度依次为
0 g/L、2.5 g/L、5.0 g/L、10 g/L、50 g/L、100 g/L 和500 g/L，高氯酸盐浓度依次为0 g/L、0.25
g/L、0.50 g/L、1.0 g/L、5.0 g/L、10 g/L 和50 g/L，标准工作液中氯酸盐同位素内标溶液浓度为
20 g/L，高氯酸盐同位素内标溶液浓度为2.0 g/L。临用现配。
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5.5 材料
5.5.1 复合固相萃取净化小柱：混合型阳离子交换/增强型脂质去除/银/氢（100 mg/30 mg/90 mg/30 mg，
3 mL）或性能相当者。
5.5.2 聚丙烯离心管：2 mL。
6 仪器和设备
6.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。
6.2 电子天平：感量为0.1 mg和10 mg。
6.3 涡旋混合器。
6.4 匀浆机。
6.5 离心机：最高转速≥10 000 r/min。
6.6 超声波提取仪。
7 实验步骤
7.1 试样制备
母乳、血液和尿液样本采集后，-20 ℃保存，测定前取出，室温融化，充分振摇均匀。
7.2 试样提取
称取0.5 g（精确至0.01 g）试样，置于2 mL 聚丙烯离心管中，加入20.0 μL 氯酸盐和高氯酸盐同
位素内标混合标准中间液（5.4.7），涡旋混合后静置30 min。加入1 mL 乙腈-甲酸水溶液（5.2.2），具塞
后震摇混匀，涡旋混匀30 s，超声提取15 min，10 000 r/min 离心5 min，取上清液待净化。
7.3 试样净化
复合固相萃取净化小柱（5.5.1）临用前10 mL 水活化，10 mL 乙腈-甲酸水溶液（5.2.2）淋洗平衡，
上样前排出柱体中残留的溶液。吸取1.0 mL 上清液过复合固相萃取净化小柱，收集流出液，10 000 r/min
离心5 min，取上清液，液相色谱-串联质谱仪测定。
7.4 测定参考条件
7.4.1 液相色谱参考条件
液相色谱条件如下：
a) 色谱柱：填料表面带有正电荷的五氟苯基柱（柱长50 mm，内径 2.1 mm，填料粒径1.7 μm），
或性能相当者。
b) 流动相：A相：乙腈，B相：0.1 %甲酸水溶液。梯度洗脱程序见表1。
c) 流速：0.3 mL/min。
d) 柱温：35 ℃。
e) 进样量：3 μL。
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表1 梯度洗脱程序
时间
min
A（乙腈）
%
B（0.1 %甲酸水溶液）
%
0.0 25 75
0.5 25 75
4.0 65 35
5.0 95 5
7.0 95 5
7.5 25 75
10.0 25 75
7.4.2 质谱条件
质谱条件如下：
a) 离子化模式：电喷雾电离负离子模式（ESI-）。
b) 扫描方式：多反应监测扫描。
c) 质谱调谐参数和定性、定量离子见附录A中表A.1。
d) 氯酸盐和高氯酸盐的多反应监测离子通道图参见附录B中图B.1。
7.5 标准曲线的制作
将氯酸盐和高氯酸盐标准系列溶液经液相色谱-串联质谱仪测定，获得相应的峰面积，以标准系列
工作溶液中氯酸盐和高氯酸盐的浓度为横坐标，以氯酸盐、高氯酸盐与其对应的同位素内标的峰面积比
为纵坐标，绘制标准曲线。
7.6 定性测定
待测组分选择两组离子，每组离子含一个母离子和一个子离子，在相同实验条件下，样品中待测组
分的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差在±2.5%之内；样品中待测组分定性离子的相对丰度
与浓度接近的标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2 规定的范围，则可判定
为样品中存在对应的待测组分。
表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度（%） ＞ 50 ＞ 20-50 ＞ 10-20 ≤10
允许的最大偏差（%） ± 20 ± 25 ± 30 ± 50
7.7 定量测定
将处理得到的试样溶液经液相色谱-串联质谱仪分析，得到氯酸盐和高氯酸盐峰面积与对应的同位
素内标物峰面积比值，根据标准曲线得到试样溶液中氯酸盐和高氯酸盐的含量。
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标准工作溶液和试样溶液中待测组分的响应值均应在标准曲线的线性响应范围内，如果待测组分
含量超过线性响应范围，则重新取样分析，增加内标添加量进行处理，并用水稀释到内标浓度和试样溶
液浓度相匹配后分析。
7.8 空白试验
除不称取试样外，均按照上述分析和测定步骤进行。
如本底值高于0.5倍定量限，应对有机溶剂进行重蒸，或更换试剂和实验器皿，直至本底值低于0.5
倍定量限。
8 分析结果计算与表述
试样中氯酸盐或高氯酸盐的含量按式（1）计算：
? =
(?−?0)?×1000
?×1000
˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙˙（1）
式中：
X—试样中待测组分的含量，以氯酸根或高氯酸根计，单位为微克每千克（μg/kg）；
c—由标准曲线计算得到的试样溶液中待测组分的质量浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
c0—由标准曲线计算得到的空白试样溶液中待测组分的质量浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
V—试样提取中加入提取液的体积，单位为毫升（mL）；
m—试样的质量，单位为克（g）；
1 000—单位换算系数。
计算结果保留3位有效数字。
9 精密度
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的15 %。
10 检出限和定量限
取样量为0.5 g 时，试样中氯酸盐的检出限为10.0 μg/kg，定量限为25.0 μg/kg；高氯酸盐的检出限
为1.00 μg/kg，定量限为2.50 μg/kg。
方法二 离子色谱-质谱/质谱法
11 原理
母乳、血液和尿液中的氯酸盐和高氯酸盐用乙腈-甲酸水溶液提取，复合固相萃取小柱净化，采用离
子色谱串联质谱检测，同位素内标法定量。
12 试剂和材料
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12.1 试剂
12.1.1 氢氧化钾（KOH）。
12.1.2 除氢氧化钾（KOH）外，其余同方法一。
12.2 试剂配制
12.2.1 100 mmol/L 氢氧化钾水溶液：称取5.61 g氢氧化钾，加水100 mL水溶解，冷却后，用水稀释定
容至1 000 mL，混匀。
12.2.2 除100 mmol/L 氢氧化钾水溶液外，其余同方法一。
13 仪器和设备
13.1 离子色谱-串联质谱仪：配有阴离子抑制器和电喷雾离子源。
13.2 除离子色谱-串联质谱仪外，其余同方法一。
14 实验步骤
14.1 试样制备
同方法一。
14.2 试样提取
同方法一。
14.3 试样净化
除采用离子色谱-串联质谱仪测定外，其余同方法一。
14.4 测定参考条件
14.4.1 离子色谱参考条件
离子色谱条件如下：
a) 色谱柱：AS20强阴离子色谱柱（柱长250 mm，内径2.0 mm，填料粒径7.5 μm），或性能相当者。
b) 抑制器：阴离子自动电解再生膜抑制器，或性能相当者。
c) 淋洗液：100 mmol/L氢氧化钾水溶液（12.2.1）在70%比例下等度洗脱。
d) 流速：0.3 mL/min。
e) 柱温：35 ℃。
f) 进样量：5 μL。
14.4.2 质谱条件
质谱条件如下：
a) 氯酸盐和高氯酸盐的多反应监测离子通道图参见附录B中图B.2。
b) 其余同方法一。
14.5 标准曲线的制作
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将氯酸盐和高氯酸盐标准系列溶液经离子色谱-串联质谱仪测定，获得相应的峰面积，以标准系列
工作溶液中氯酸盐和高氯酸盐的浓度为横坐标，以氯酸盐、高氯酸盐与其对应的同位素内标的峰面积比
为纵坐标，绘制标准曲线。
14.6 定性测定
同方法一。
14.7 定量测定
同方法一。
14.8 空白试验
同方法一。
15 分析结果计算与表述
同方法一。
16 精密度
同方法一。
17 检出限和定量限
同方法一。
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附 录 A
（资料性）
仪器分析参考条件
A.1 质谱参考条件：
a) 毛细管电压：3.0 kV；
b) 离子源温度：300 ℃；
c) 加热块温度：400 ℃；
d) 脱溶剂气温度：530 ℃；
e) 加热气（N2）流量：10 L/min；
f) 雾化气流量：3 L/min；
g) 分辨率：单位质量分辨；
h) 扫描方式：多反应监测；
i) 氯酸盐和高氯酸盐母离子、子离子、偏转电压和碰撞电压见表A.1。
表A.1 氯酸盐、高氯酸盐的主要质谱参数
化合物名称 母离子（m/z） 子离子（m/z）
偏转电压
（V）
碰撞电压
（V）
氯酸盐
83.0 67.0* 9 21
85.0 69.0 9 22
氯酸盐内标
89.0 71.0* 9 21
91.0 73.0 9 21
高氯盐
99.0 83.0* 10 28
101.0 85.0 10 28
高氯酸根盐内标
107.0 89.0* 10 28
109.0 91.0 10 28
注：*为定量离子；当采用不同质谱仪器时，仪器参数可能存在差异，测定前将质谱参数优化到最佳。
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附 录 B
（资料性）
氯酸盐和高氯酸盐标准品的多反应监测图
液相色谱-质谱/质谱法的氯酸盐和高氯酸盐谱图见图B.1。
图B.1 液相色谱-质谱/质谱法谱图
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离子色谱-质谱/质谱法的氯酸盐和高氯酸盐谱图见图B.2。
图B.2 离子色谱-质谱/质谱法谱图
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