CCS B 05
北京林木种苗产业协会团体标准
T/BJZMXH 508—2024
桔梗组培与林下栽培技术规程
Technical regulation for tissue culture and understory cultivation of Platycodongrandiflorus
2024 - 12 - 01 发布2024 - 12 - 31 实施
北京林木种苗产业协会 发布
目次
前言.................................................................................. II
1 范围................................................................................ 1
2 规范性引用文件...................................................................... 1
3 术语和定义.......................................................................... 1
4 组织培养............................................................................ 1
准备工作........................................................................ 1
培养基制作...................................................................... 2
外植体的选择及消毒.............................................................. 2
初代培养........................................................................ 3
继代培养........................................................................ 3
生根培养........................................................................ 3
种苗培养........................................................................ 3
5 林下种植及管理...................................................................... 4
林地环境........................................................................ 4
整地施肥........................................................................ 4
林下种植与养护.................................................................. 4
除草............................................................................ 4
排水............................................................................ 4
病虫害防治...................................................................... 4
6 采收................................................................................ 4
采收期.......................................................................... 4
采收方法........................................................................ 5
7 技术档案管理........................................................................ 5
附录A（资料性） 桔梗组培各阶段培养基与激素用量配方表..................................6
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II
前言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由北京林木种苗产业协会提出并归口。
本文件由北京林木种苗产业协会组织实施。
本文件起草单位：燕赵园林景观工程有限公司北京分公司、北京林木种苗产业协会、北京京林生态
建设有限公司、廊坊市自然资源和规划局、廊坊市农林科学院、北京市大安山林场管理处、北京华天园
林绿化工程有限公司、北京花乡花卉科技研究所有限公司、天津创世生态景观建设股份有限公司。
本文件主要起草人：王文超、刘晓杰、索鹏、唐玉红、高航、刘向丽、王桂英、温江涛、孙秀一、
李金凤、刘小妹、辛培培、孟慧颖、王亮、李金苹、刘士庆。
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桔梗组培与林下栽培技术规程
1 范围
本文件规定了桔梗组织培养、林下种植及管理、采收及技术档案管理等内容。
本文件适用于桔梗的组织培养与林下栽培。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB 3905 环境空气质量标准
GB/T 6001 育苗技术规程
GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则
NY/T 1868 肥料合理使用准则有机肥料
NY/T 2306 花卉种苗组培快繁技术规程
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
外植体explant
用于组织培养的组织、器官、细胞及原生质体。
增殖proliferation
外植体或继代组培苗产生新的具有特定结构和功能的组织或器官的现象。
继代培养subculture
培养过程中将培养材料周期性分株、分割、剪截等转接于新鲜培养基上进行增殖扩繁的过程。
生根培养rooting culture
在组培瓶内诱导无根芽苗产生根形成完整植株的培养过程。
4 组织培养
准备工作
4.1.1 消毒灭菌
4.1.1.1 洗涤室
每天擦拭桌面，清扫地面。每周用消毒液拖地一次。
4.1.1.2 培养室
摆放材料前及每次转接材料时用75%酒精擦拭培养架。每周用消毒液拖地一次，每月对环境整体消
毒一次。
4.1.1.3 接种间
接种间应保持干爽整洁，每周用紫外线灯照射3 h～4 h。
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4.1.1.4 超净工作台
接种前，应用紫外线灯照射超净工作台20 min～30 min后用75%酒精、灭菌纱布喷洒擦拭台面。每
半年清洗超净工作台初效过滤网一次。
4.1.1.5 培养容器和接种器械
4.1.1.5.1 培养容器
培养容器可选择耐高温、高压、高透光的容器。瓶盖应带滤菌透气膜。
4.1.1.5.2 接种器械
使用前，应对接种器械在300 ℃高温条件下灭菌，放凉后备用。
4.1.1.6 培养基
应在高温高压蒸汽灭菌锅中以压强0.11 MPa、温度121 ℃灭菌20 min～30 min。
4.1.1.7 污染材料处理
培养过程中被真菌和细菌污染的培养瓶，应高压灭菌后再对培养瓶进行清洗。
培养基制作
4.2.1 培养基配方
基本培养基应采用MS培养基。初代培养基、继代培养基、壮苗培养基及生根培养基与激素用量配方
表见附录A。
4.2.2 母液和激素配制
培养基母液和激素母液配制及保存方法按照NY/T 2306执行。
4.2.3 培养基制作流程
培养基制作流程如下：
a) 准备好母液、蒸馏水、蔗糖、琼脂、激素；
b) 将蒸馏水、母液、蔗糖（初代、继代和壮苗培养为30 g/L，生根培养为15 g/L）、琼脂（4.5
g/L～5.5 g/L）、按配置的培养基选择激素用量依次倒入容器中，调节PH 值为5.8～6.0，并
加热到沸腾；
c) 应对配置好的溶液进行分装、封口、灭菌；
d) 宜将配置好的培养基放置在室温25 ℃以下、干净避光的药品柜中静置，凝固后剔除不合格培
养基。
4.2.4 培养基保存
将配置好的培养基放置到室温25 ℃以下、干净避光的药品柜中保存，保存期限不应超过7 d。
外植体的选择及消毒
4.3.1 外植体选择
宜在4～5月份，连续3 d以上的晴天，采集生长旺盛、无病虫害的当年生嫩枝段做外植体。
4.3.2 外植体消毒
4.3.2.1 预处理
将采集的外植体剪取2 cm～3 cm长茎段，剪去叶片，用洗涤灵溶液浸泡、振荡10 min～20 min后，
用自来水冲洗0.5 h～1 h。
4.3.2.2 消毒处理
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在超净工作台上将预处理后的外植体放在组培瓶中，用75% 酒精没过外植体浸泡30 s后倒去酒精，
并用无菌水冲洗外植体3遍。将外植体转移至新的无菌组培瓶中，再用0.1%的升汞溶液浸泡8 min～10
min，不断轻摇，灭菌结束后倒出灭菌液，并用无菌水冲洗5遍，将外植体放无菌滤纸上吸干水分备用。
初代培养
在超净工作台上将已消毒的外植茎段两端各剪去2 mm，直立插入诱导培养基，每个培养瓶接种4～5
个茎段，均匀分布，接种后将培养瓶口在酒精灯火焰上灼烧1 s～2 s，迅速盖好瓶盖。在培养瓶上标明
品种名称、接种日期、接种人等信息，放入培养室培养。培养室温度控制在25 ℃±2 ℃，相对湿度70%～
80%，光照时间12 h/d，光照强度2000 lx。
继代培养
在诱导培养基中培养30 d出芽后，用已灭菌的接种剪，将芽高1.5 cm以上的芽苗剪下，剪成1.5 cm
左右茎段，转接至继代培养基中，每瓶接种10段；生长20 d～30 d后，将继代培养基中获得的丛生芽苗，
再次转接至新配制的继代培养基中；此后依据种苗扩繁数量要求，定期将继代培养基中的丛生芽分割、
转接，扩大基数苗数量。培养室温度应控制在25 ℃±2 ℃，相对湿度70%～80%，光照时间12 h/d，光
照强度2000 lx，继代培养的第一周可暗培养。
生根培养
4.6.1 壮苗培养
将继代培养基中生长的单独芽苗剪成2 cm长的茎段，转入壮苗培养基中培养，每瓶接种5段。此后
依据种苗扩繁数量要求，每隔30 d转接一次。培养室温度应控制在25 ℃±2 ℃，相对湿度70%～80%。
光照时间12 h/d，光照强度2000 lx ～2500 lx。
4.6.2 生根培养
将经过壮苗培养的组培苗剪成2 cm长的茎段，转入生根培养基中培养20 d。培养室温度应控制在
25 ℃±2 ℃，相对湿度70%～80%。光照时间12 h/d，光照强度2500 lx。
种苗培养
4.7.1 炼苗
待苗高长至4 cm～5 cm，根长2 cm时可进行炼苗移栽。移栽前，瓶苗应放在有散射光的环境里封口
培养1周。
4.7.2 穴盘苗培养
4.7.2.1 穴盘选择
宜选择尺寸为54 cm×28 cm的72孔穴育苗盘。
4.7.2.2 基质准备
将蛭石和泥炭土（草炭土）按1:1体积比例混合均匀，装盘压实后用0.5 g/L的多菌灵溶液杀毒灭菌
后备用。
4.7.2.3 洗苗
将培养瓶里的组培苗轻轻取出放入清水中清洗掉表面培养基后分级码放。
4.7.2.4 移栽
将分级后的组培苗快速移栽到育苗盘，浇透水后用500～800倍的50%多菌灵喷雾杀菌，宜放入塑料
薄膜拱棚内保湿。
4.7.2.5 养护
4.7.2.5.1 环境控制
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移栽后，前3 d应保持环境湿度100%，温度23 ℃～28 ℃，光照强度3000～4000 lx；第4 d～10 d，
每天通风一次，逐渐加大通风量，以幼苗叶片不出现萎蔫为宜，保持湿度70%～80%，温度23 ℃～28 ℃，
光照强度应逐步加强，可根据天气阴晴状况用遮阳网调节。
4.7.2.5.2 水肥管理
第10 d后去掉拱棚薄膜，每天上午、下午各喷水一次，每隔7 d叶面喷施微量元素水溶肥一次。
4.7.3 容器苗培养
4.7.3.1 准备工作
宜选择5 cm×5 cm×7 cm塑料穴盘或5 cm×7 cm的美植袋，将蛭石与泥炭土（草炭土）按体积比1:1
混合均匀后装盘（或袋）浇透水备用。
4.7.3.2 容器苗培养
当苗高长至5 cm～7 cm时转入容器中培养。在基质中间开3 cm～4 cm的种植孔，将穴盘苗脱模后移
入种植孔中，与基质齐平压实，并浇透水。培养20 d后，待苗高长至15 cm±5 cm时可做定植苗栽培。
5 林下种植及管理
林地环境
宜选择郁闭度0.6以下的林地。
整地施肥
应清除林间杂草、石块等杂物。整地时深翻30 cm以上，并施入腐熟农家肥或生物有机肥。施肥量
按照NY/T 1868执行。
林下种植与养护
5.3.1 选苗
宜选择苗高15 cm±5 cm的容器苗。
5.3.2 种植方法
移栽前一周应浇一次透水。按行距25 cm～30 cm，株距10 cm～15 cm，开沟深度10 cm～15 cm种植，
覆土压实后浇透水。
除草
应遵循“除小、除早、除了”的原则，及时中耕除草。
排水
遇涝时应及时排水。
病虫害防治
以预防为主，综合防治为原则，优先采取物理防治和生物防治措施。
6 采收
采收期
6.1.1 嫩芽采收期
宜在4～5月采收嫩芽。
6.1.2 鲜花采收期
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宜在6～9月采收鲜切花，花苞透色时采收最佳。
6.1.3 根采收期
宜在10月至12月采收2年以上的根。
采收方法
6.2.1 嫩芽采收
可在距地面高10 cm处掐尖采收。
6.2.2 鲜花采收
可在距地面高20 cm处进行剪截，剪后枝材应及时进行保水处理。
6.2.3 根采收
秋季割去茎叶，采用人工或机械挖出2年以上的肉质根，洗净泥土，去掉根须，进行干燥、分级。
7 技术档案管理
按照GB/T 6001执行。
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A
A
附录A
（资料性）
桔梗组培各阶段培养基与激素用量配方表
表A.1给出了桔梗组培各培养阶段的培养基与激素具体用量。
表A.1 桔梗组培各阶段培养基与激素用量配方表
培养阶段培养基与激素用量（mg/L）
初代培养MS+6BA 1.0+IBA 0.5
继代培养MS+6BA 1.0+NAA 0.5
壮苗培养1/2MS+IBA 0.5
生根培养1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.3
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